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如何加速您的GTPASES研究?

发布时间: 2019-03-29


在过去的几十年中,全球科学家一直在研究小GTPases在癌症中的作用。激动人心的研究结果表明小GTPase能影响多种细胞过程,进而影响癌症进程,包括细胞骨架动力、细胞周期进程、转录调控、细胞存活和囊泡运输。


我们的Thermo Scientific™ GTPase pull-down和检测试剂盒能够协助您的活性和组装GTPase复合物研究。

这些试剂盒通过选择性富集G T P a s e 活性形式,实现GTPase活性研究。它们包含了一个GST蛋白结合区域(PBD)融合,对活性Rho,Ras,Rac1,Cdc42,Rap1或Arf1选择性结合。不同的下游效应蛋白的蛋白结合区域表达为GST融合蛋白。固定在谷胱甘肽琼脂糖树脂上,蛋白结合区域会结合细胞裂解液中的活性GTP连接的GTPase。

应用

• 在细胞分化、迁移、分裂和细胞骨架重组中跟踪小GTPases活性。

• 研究压力纤维形成过程中GTPase活性

• 监控生长因子刺激后活性

• 筛选影响活性小分子抑制因子

我们的活性GTPase拉下和检测试剂盒提供有效方式,使用时间相关活性分析监控GTPase酶功能敏感变化,帮助科学家评估小GTPases在某些疾病,比如癌症和代谢疾病中的参与度。


每日英雄

Roman Fischer

Roman Fischer博士

英国牛津大学

Thermo Scientific TMT

研究基金2017金级获奖者


研究领域:Fisher博士领导牛津大学靶点发现研究所蛋白组部。他的职业专长涵盖了从基础研究项目到临床新药物靶点和市场开发等合作工作,甚至还有古蛋白组。目前Fisher博士和他的团队关注的是样品准备方法的筛选,以此来增强使用有限的临床材料进行深度蛋白组研究灵敏度和效率。

挑战:培养细胞深度蛋白组是很容易获得的。但是,从有限的生物材料-比如组织部分或某种表型的单个分离细胞(比如通过排列或激光捕获,显微切割)-中检测到>2000蛋白质还是相当困难的,而后者相当接近单细胞蛋白组。

他是如何解决这一困难:Fisher博士和他的团队使用 Purkinje神经元激光捕获显微切割,评估不同样本准备方法从少量细胞中辨识出最多蛋白的效率。蛋白微珠固定加上后续消化(SP3方法)获得的可识别蛋白数量最多,比标准溶液内消化、FASP和iST方法都要多。

好结果:SP3方法能够大约从200个Purkinje细胞中检测出>2500蛋白质。团队通过把这种方法和串联质谱标签(TMT)试剂和初步组分分离相结合,预期能够从一个样本中对不同脑细胞类型进行深度蛋白质检测和定量分析,从而在细胞精度水平上获得空间蛋白分析结果。



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