一个抗体分子上的两个抗原结合部位是相同的，位于两臂末端称抗原结合片段（antigen-binding fragment, Fab）。'Y'的柄部称结晶片段（crystalline fragment,Fc），糖结合在FC 上。Fab是抗原结合片段，直接结合抗原。直接效应。Fc是结晶片段，间接效应端。

抗体与细胞的结合过程中一般会出现以下情况：

• 在抗体孵育过程中，只有抗体的Fab端与目标抗原结合（特异性结合）时，这样的流式图才能反应出细胞抗原表达的真实情况。

• 但是，在分子间各种作用力的推动下，抗体FC端也经常与细胞表面的FC受体结合，即我们常说的非特异性结合，此时流式结果就往往不能反映真正的抗原表达情况。

那么，我们在实验中如何避免这种非特异性情况的出现呢？

• FC受体封闭：

  加入FC受体封闭剂，对细胞膜表面的FC受体提前进行人工封闭干预；或做CD16/CD32抗体封闭实验；

• 同型对照（Isotype）抗体；

• 重组基因工程改造抗体（REAfinity™ Recombinant Antibodies）。

如上图所示，REAfinity™重组基因工程改造抗体的制备过程与传统杂交瘤抗体不同，因此也具备独特的优势：高纯度、批次稳定性、高重复性：

• REAfinity™抗体是挑选市场上最佳克隆号的抗体，克隆出特异性的Fab片段，因此，特异性和亲和力都非常高

• 将该Fab序列与人IgG1 Fc段序列重组，同时，对Fc段序列进行点突变，使其不会对Fc γ受体产生非特异性结合，因此也无需使用FC受体阻断剂。同时，只需要根据荧光素选择相应的通用型同型对照抗体，无需根据FC端亚型选择各种Isotype，一举多得

  

如图，使用REAfinity抗体时，无需使用FcR阻断剂，几乎无非特异染色。

使用REAfinity类抗体时，仅需选用通用型同型对照抗体。

• 最后，将重组后的抗体序列转入HEK 293细胞表达并纯化获得重组抗体，纯度更高、批次稳定性更好
  

REAfinity抗体无轻链干扰，抗体纯度更高。

REAfinity重组基因工程改造抗体，让您的流式分析/分选实验更加精确，更加稳定！